LIQUIDO PLEURAL

Una gota de agua oxigenada puede diferenciar los exudados de los trasudados pleurales

En la evaluación de un líquido pleural (LP) es muy importante la diferenciación de si se trata de un exudado o un trasudado. Los líquidos pleurales trasudativos son producidos por factores que han alterado el equilibrio entre la formación y la eliminación del líquido pleural a nivel sistémico, por ejemplo; fallo del ventrículo derecho, o cirrosis.
Los líquidos pleurales del tipo exudado proceden de desordenes locales de dicho equilibrio, por ejemplo; neumonía bacteriana, cáncer, infección virica, etc.
Para diferenciarlos existen los llamados criterios de Light. Se trata de un exudado si se cumple al menos uno de lo siguientes criterios:
1) El cociente proteínas del LP y suero del paciente es mayor de 0,5
2) El cociente LDH en líquido pleural y suero del paciente es mayor de 0,6
3) El nivel de LDH pleural es mayor de 2/3 que el nivel máximo normal de la LDH sérica

El objeto de este trabajo realizado en Calcuta (India) ha sido demostrar si una técnica tan sencilla como la adición de una gota de agua oxigenada al líquido pleural puede equipararse a los criterios de Light en la diferenciación de los exudados y trasudados del LP.
El estudio se hizo sobre 84 LP, que fueron clasificados mediante los criterios de Light y mediante la adición a 200 uL de LP, de 10 uL de peróxido de hidrogeno, tras inspección visual para observar la formación de abundantes burbujas, indicando la existencia de catalasa.
El resultado fue que los 52 LP exudativos mostraron abundante formación de burbujas dentro del primer minuto tras la adición.
Los 32 LP de tipo trasudativo no mostraron la formación de burbujas por este método.
En el caso de contaminación con sangre es evidente que el método es inválido.
Pero en los demás casos mostró el mismo valor que los criterios de Ligth con la enorme ventaja de que puede realizarse in situ sin necesidad de transportar la muestra al laboratorio, además de su bajo coste.

Clin Chim Acta. 2009 Apr 14.

PENTRAXINA 3

Pentraxina 3 un nuevo marcador de inflamación vascular predice resultados adversos en pacientes con fallo cardíaco.

La Pentraxina 3 es un nuevo marcador de inflamación producida por las células endoteliales, las del músculo liso y los macrófagos. El objeto del presente estudio es examinar el significado clínico de los niveles de Pentraxina 3 en pacientes con fallo cardíaco. Se midieron los niveles de Pentraxina 3 en el suero de 196 pacientes con fallo cardíaco y 60 sujetos de control sanos, mediante una técnica de ELISA. Se hizo un seguimiento de los pacientes durante 655 días de media, finalizando, bien con la muerte por fallo cardíaco o bien por hospitalización por la misma causa.
Los resultados han demostrado que los pacientes que desarrollaron fallo cardíaco tuvieron niveles más altos de Pentraxina 3 que los sujetos de control sanos. Durante el período de estudio ocurrieron 63 problemas cardíacos y se relacionaron siempre con niveles mayores de Pentraxina 3, además se vio que estos niveles son un marcador predictivo de problemas cardíacos independiente.
Además según el nivel de Pentraxina 3 se estratificaron 4 grupos de riesgo.
En definitiva los niveles de Pentraxina 3 parece que son bastante útiles como marcador predictivo de fallo cardíaco independiente a la vez que no se ven afectados por otras patologías.

Am Heart J. 2008 Jan;155(1):75-81

LEGIONELLA

Comparación de la sensibilidad de los kits de EIA para detección de Antígeno Urinario de Legionella

La detección urinaria del Antígeno de Legionella es una de los métodos más utilizados en el diagnóstico de la Enfermedad del Legionario en la actualidad. En este estudio los autores han comparado 2 kits comerciales en cuento a sensibilidad de los mismos, en muestras urinarias.
Se utilizaron 33 muestras de orina de pacientes diagnosticados mediante cultivo (30 cultivos) de Legionella pneumophila serogrupo 1, subgrupo no-Pontiac y 35 muestras de orina negativas comprobadas (32 cultivos ) mediante cultivo para L. pneumophila y no serogrupo 1, mediante 2 kits comerciales a saber el de Binax EIA y Biotest EIA respectivamente.
Para ambos grupos de muestras el kit de Binax tuvo una sensibilidad mucho más alta que el de Biotest. Para el grupo no-Pontiac, la sensibilidad fue del 81,8% y 42,4 % respectivamente y para no-subgrupo 1 fue de 51,4% y 28,6% respectivamente.
La conclusión es que el test de Binax EIA es mucho más adecuado que el de Biotest ya que se requiere una muy alta sensibilidad en la detección de antígeno urinario de Legionella en los casos de Legionelosis de no-subgrupo 1.

Eur.J.Clin.Microbiol.Infetc.Dis. 2009 Feb 7

ICTERICIA NEONATAL

¿Es la Haptoglobina un indicador precoz de ictericia neonatal?

La ictericia neonatal es el resultado de un desequilibrio entre la producción y la eliminación de la bilirrubina. La conjugación de la bilirrubina en los recién nacidos esta significativamente alterada en los primeros días de vida, incluso un pequeño aumento en la producción puede contribuir al desarrollo de una hiperbilirrubinemia.
La hemólisis tiene un papel importante en el incremento de la bilirrubina en el recién nacido, mientras el bebe está en el útero el metabolismo materno se encarga del problema. Cuando la hemólisis tiene lugar se produce una disminución de la haptoglobina y la hemopexina circulantes.
Por lo tanto puede considerarse que la haptoglobina y la hemopexina pueden ser un indicador temprano, en la sangre de cordón umbilical (UC) de recién nacido, de la probabilidad de desarrollar ictericia neonatal.
Se hicieron controles en el 3º y 5º día de vida a recién nacidos, incluyendo 84 bebes normales. La edad gestacional de las madres fue de 39,5 +7-1,5 semanas de media.
Se encontró en una parte importante de los bebes del estudio una correlación negativa entre los niveles de haptoglobina en UC tomadas durante el parto y el valor de la bilirrubina en el 5º día (r=-0,345).
Así la haptoglobina en UC puede utilizarse como una guía indicadora temprana de la aparición de ictericia neonatal, de este modo los bebes con alto riesgo de ictericia puede ser detectados prematuramente y realizarse un mejor seguimiento.

J Clin Lab Anal. 2008;22(6):409-14

CADENAS LIGERAS

Cuantificación de cadenas ligeras libres en combinación con electroforesis de proteínas en el diagnóstico del mieloma multiple

La medición de cadenas ligeras libres (SFLC) en suero ha llegado a ser recientemente una ayuda en el diagnóstico de las gammapatías monoclonales. Se evaluó SFLC en combinación con la electroforesis de proteínas séricas (SPE) y información clínica para diagnóstico del Mieloma Multiple (MM) en una población hospitalaria.
Se midió SFLC en 3818 sueros recibidos para SPE a lo largo de un período de 1 año, asociados a síntomas o hallazgos bioquímicos compatibles con MM.
Se revisó SPE y SFLC de 489 pacientes junto con el diagnóstico final obtenido en el hospital.
SFLC combinado con SPE y la información clínica detectó el 95 % de los pacientes (38 de 40) que previamente no habían sido diagnosticados de MM, macroglobulinemia o amiloidosis primaria.
Adicionalmente se identificó a 45 pacientes con gammapatía monoclonal de significado incierto (MGUS) y 4 con plasmocitoma.
Sólo 1 paciente se escapó del screening con MM, este paciente tenía anemia y erróneamente no se midió SFLC.
Un ratio kappa/lambda anormal se encontró en 26 de 29 pacientes con MM pero también 36 de 203 con enfermedad renal, inmunorespuesta policlonal u otras enfermedades no hematológicas.
El uso combinado de SPE y SFLC junto con criterios diagnósticos, mostró una gran eficiencia diagnóstica en el MM.

Clin Chem 2008 Nov;54(11):1823-30

pH VAGINAL

Utilización del pH vaginal en el diagnóstico de infecciones

El incremento del pH de la secreción vaginal es un indicador de vaginosis bacteriana aunque es una herramienta que aún se utiliza poco por los clínicos. No existen datos sobre el efecto de la infección por Chlamydia trachomatis y problemas reproductivos sobre el pH de la secreción vaginal.
Este estudio ha evaluado estos factores en las pacientes externas de ginecología de un hospital.
Se midió el pH de la secreción vaginal en 358 mujeres, 45 con abortos espontáneos de repetición, 79 con diagnóstico de infertilidad, 185 con síntomas de infección del tracto genital inferior y 49 sin problema alguno.
Se encontró un pH normal en el 72,6 %, 21,5 % de vaginosis bacteriana (VB) , y 10,1 % de C.trachomatis.
VB e infección por C. trachomatis se observaron en el 78,6 % y 4,1 % de mujeres respectivamente con un pH vaginal alto.
El 12,3 % de mujeres con infección por C. trachomatis tuvieron un pH normal.
La conclusión del trabajo es que el pH de la secreción vaginal no es un buen sistema diagnóstico para la infección por C.trachomatis ni para los problemas reproductivos, pero el aumento del pH de la secreción vaginal sí que tiene una muy buena correlación con la VB.

J Clin Lab Anal. 2008;22(5):375-9.

ENFERMEDAD DE WILSON

DIAGNOSTICO RAPIDO DE LA ENFERMEDAD DE WILSON MEDIANTE UN PANEL DE 28 MUTACIONES

La enfermedad de Wilson es una de las más comunes enfermedades hereditarias, que puede ser tratada con éxito.
Cerca del 5 al 27 % de los pacientes requiere quelación y trasplante hepático para salvar su vida. El diagnóstico en pleno fallo hepatico resulta difícil por el corto espacio de tiempo de que se dispone. El diagnóstico molecular directo permanece como una herramienta definitiva.
Los autores han desarrollado una técnica en un paso, con 3-h mutaciones mediante PCR en tiempo real que permitió la detección de todas las mutaciones simultaneamente.
Las mutaciones detectadas fueron:
p.S105X, p.Q511X, p.R616Q, p.S693P, p.S693C, p.R778L, p.A874V, p.T888P, p.R919G, p.T935M, p.P992L, p.M1025R, p.D1047V, p.I1148T, p.R1156H, p.T1178A, p.V1216M, p.P1273Q, p.G1281C, p.R1320S, p.V1334D, p.V176SfsX28, p.G869EfsX4, IVS3+1G>T, IVS4-1G>C, IVS4-5T>G, IVS6+9A>G, and IVS9+5G>T La reacción se desarrolló en un aparato Quantitect de Applied Biosystems. Los primers de todas las mutaciones fueron altamente especificos con ausencia de amplificación tipo salvaje. Todos los resultados fueron validados por sequenciación de DNA directa.

Clin Chim Acta. 2008 Dec;398(1-2):39-42

ENFERMEDAD DE ALZHEIMER

Visinina Like Proteína (VLP-1) aumentada en la Enfermedad de Alzheimer

De momento el diagnóstico definitivo de la Enfermedad de Alzheimer (EA) esta basado en el examen histopatológico del tejido cerebral. Se han buscado y continuan buscando marcadores bioquímicos de la enfermedad pre-morten que faciliten el diagnóstico de EA
Hasta el momento los mejores marcadores han resultado ser:
1-42 aminoacido amiloide beta peptido (Abeta 1-42)
Total Tau (tTau)
Hiperfosforilado Tau (pTau)
Aparece ahora un nuevo marcador de daño cerebral la Visinina Like Proteína (VLP-1) que aparece alterada en el líquido cefalorraquídeo de los pacientes con EA
Se utilizó un test de ELISA para medir estos 4 marcadores en 33 pacientes con EA y 24 controles sanos.
Se vio que VLP-1 aislado tiene la misma efectividad que cualquiera de los otros 3, pero utilizando los 4 juntos se obtiene un mejor rendimiento para el diagnóstico de EA.
Se obtuvieron valores sustancialmente elevados de VLP-1 en pacientes con EA (media de 365 ng/L) comparado con los controles sanos (media de 244 ng/L)
Estos resultados sugieren que los marcadores de daño cerebral pueden ser útiles en el diagnóstico de EA.

Clin Chem. 2008 Aug 14.

METANEFRINAS

Precipitación de proteínas con isopropanol para la determinación de Metanefrinas libres en plasma mediante cromatografía líquida-detección con espectrometría de masas

La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con detección mediante espectrofotometría de masas es el método más sensible y exacto para la determinación de metanefrinas libre y el diagnóstico de Feocromocitoma.Los autores han probado una modificación sobre este método consistente en una precipitación externa de proteínas interferentes mediante isopropanol.
Este nuevo método tiene un limite de cuantificación de 0,09 nmol/L y 0,17 nmol/L para metanefrina y normetanefrina respectivamente. Comparando este método con los previos de HPLC se obtuvo una regresión del 0,904 y 0.994 respectivamente.
La eficiencia de la extracción con isopropanol fue del 66% para metanefrina y del 35% para normetanefrina, claramente superiores al 4% y 1% habituales.
Se trata de un sistema muy efectivo, que trabaja con un volumen de muestra muy bajo, tan solo 200 uL de plasma y es una alternativa más barata.

Clin Chem. 2008 Aug 7

LOA LOA

Nuevo método, rápido y específico para el diagnóstico de la infestación por Loa loa

La dificultad del diagnóstico específico de la infestación por Loa loa continua hasta el presente y siempre es bien recibido algún método que mejore el diagnóstico de esta parasitosis.
El presente trabajo esta basado en un método que se llama LIPS ( luciferase immunoprecipitationsystems). Este método tiene muchas ventajas entre las que destacaré la amplificación de señal que puede llegar a 1 millón de veces. En un ELISA es de unas 15.000 veces. Pero además en esta técnica el antígeno puede fijarse en 3 dimensiones en una placa plástica y es muy rápido, unos 15 minutos, comparados con las cerca de 2 horas de un ELISA.
En este trabajo se utilizó un LIPS con anticuerpos recombinantes al SXP-1 de Loa loa, se desarrolló para IgG e IgG4 y se testó con pacientes infectados de Loa loa, Onchocerca volvulus, Mansonella perstans, Strongiloides stercolaris y Wuchereria bancrofti.
No se apreció un cambio significativo entre IgG e IgG4, pero si una mejora muy sustancial en sensibilidad y especificidad que en ELISA es del 67% y 99 % respectivamente y pasa al 100% y 100% respectivamente.
El método es bastante bueno y como es muy rápido, menos de 15 minutos, podría utilizarse en el point-of-care para otras muchas enfermedades parasitarias.

J Clin Microbiol. 2008 May 28.